3.1. lên men chìm

Một nghiên cứu được thực hiện để tối ưu hóa các yêu cầu dinh dưỡng (17 carbohydrate, 16 hợp chất nitơ, 9 vitamin, 4 nguyên tố đa lượng, 4 nguyên tố vi lượng và 8 tỷ lệ carbon so với nitơ) để canh tác thành công CS trong ngập nước trong đó tối đa là 22 g/ l sinh khối sợi nấm có thể thu được trong môi trường nuôi cấy ngập nước sau 40 ngày ( Dong & Yao, 2005 ). Các điều kiện tăng trưởng và các yếu tố dinh dưỡng tiếp theo đã được tối ưu hóa để tối đa hóa việc sản xuất polysacarit ( Hsieh et al., 2005 ,   Leung et al., 2005 ), exo-polysaccharid và cordycepin ( Kim & Yun, 2005 ). Nỗ lực so sánh các đặc điểm sinh trưởng của CS với các loại nấm nội sinh khác ở Nepal Himalaya ( Bikash & Jyoti, 2012 ) cho thấy tốc độ sinh trưởng của CS rất chậm so với các loại nấm liên quan khác.   Lương và Ngô (2007)  đã nghiên cứu tác động của việc cung cấp amoni đối với việc sản xuất cordycepin (3′-deoxyadenosine, một chất tương tự nucleoside) và exopolysacarit (EPS) trong nuôi cấy sợi nấm CS mới (Cs-HK1) ( Leung & Wu, 2007 ).

4.1. polysacarit

Polysacarit là chất đóng góp chính cho hầu hết các hoạt động sinh học của CS. Thật khó để sử dụng chúng làm chất đánh dấu để kiểm soát chất lượng do cấu trúc phức tạp và khối lượng phân tử lớn.   Guan, Zhao, Feng, Hu và Li (2011)  đã thử phân tích định tính và mô tả đặc tính của polysacarit bằng phương pháp gọi là “ánh xạ saccharide” ( Guan & Li, 2010 ) và báo cáo một loạt các monome tạo nên khối đại phân tử của polysacarit chứa chính (1→4)-β, (1→4) -α, (1→6)-α-glucosidic và 1→4-β- d -mannosidic liên kết, v.v. ( Guan et al., 2011 ). Ngoài ra, hàm lượng carbohydrate được chiết xuất bằng phương pháp chiết xuất chất lỏng điều áp (PLE) trong cả CS tự nhiên và nuôi cấy được so sánh và 10 monosacarit (rhamnose, ribose, arabinose, xyloza, mannose, glucose, galactose, mannitol, fructose và sorbose) được xác định bằng GC– MS ( Quan, Yang, & Li, 2010 ). Methyl hóa, suy thoái Smith, acetolysis, quang phổ NMR ( ¹ H,   ¹³ độ C,   ¹³ C– ¹ H 2D-COSY) và các nghiên cứu thủy phân bằng axit đã được tiến hành để xác định đặc điểm cấu trúc của   d -glucan (xương sống bao gồm (1→4)- d -glucosyl và mang một (1→6)-liên kết   d -glucosyl), thể hiện đặc tính kích thích miễn dịch ( Yalin, Cuirong, & Yuanjiang, 2006 ) và trong một nghiên cứu khác, phân tích cấu trúc của một chất trung tính (1→3), (1→4)-β- d -glucan đã được thực hiện bằng phép đo quang phổ NMR và IR ( Yalin, Cuirong, & Yuanjiang, 2005 ). Mannitol (rượu đường) là một hợp chất khác được phát hiện có hoạt tính chống oxy hóa được chiết xuất từ ​​tự nhiên (32,22 ± 1,5 g/100 g dịch chiết) và sợi nấm nuôi cấy (21,77 ± 0,73 g/100 g dịch chiết) của CS ( Dong & Yao ). , 2007 ). Một mannoglucan trung tính (các đơn vị Man và Glc theo tỷ lệ mol 1:9) được đặc trưng bằng cách sử dụng phân tích hóa học và quang phổ NMR và IR, và cấu trúc của nó cho thấy xương sống của α- d -glucan với (1→4) và (1→3) -liên kết và chuỗi bên của α- d -(1→6)-Manp được gắn vào xương sau thông qua O-6 của các gốc α-(1→3)-Glcp ( Wu, Hu, Pan, Zhou, & Châu, 2007b ). Từ ascocarps của CS, bằng cách chiết xuất nước nóng và phân đoạn etanol, galactomannan đã được tinh chế từ CS-I và cấu trúc của nó được làm sáng tỏ bằng cách sử dụng quá trình oxy hóa định kỳ, phân hủy Smith, phân tích methyl hóa, thủy phân axit một phần và  Phép đo phổ ¹³ C NMR, tiết lộ rằng nó chứa lõi mannan dưới dạng (1→2)-dư lượng liên kết α- d -mannopyranosyl và galactosyl dưới dạng nhánh chứa (1→3), (1→5) và (1→6)- liên kết- d -galactofuranosyl, (1→4)-liên kết- d -galactopyranosyl dư lượng ( Toshio, Naoko, & Haruki, 1977 ) và trong một nghiên cứu khác, một loại protein nhỏ chứa galactomannan từ chiết xuất natri cacbonat 5% của CS đã được tìm thấy ( Kiho, Tabata, & Ukai, 1986 ).   Nie et al. (2011)  đã nghiên cứu các đặc điểm cấu trúc của polysacarit ưa nước (CBHP) bằng cách sử dụng phân tích methyl hóa và quang phổ 2D NMR. Theo họ, cấu trúc polysaccharid được cấu tạo chủ yếu từ glucose (95,19%) cấu tạo nên xương sống nơi Glc p  các đơn vị được liên kết thông qua liên kết α-1,4 (65,7%), tiếp theo là t-Glc p  (20,7%), 1,2,3,6-Glc p  (4,1%), 1,2,4,6-Glc p  (3,0%), 1,3,6-Glc p  (2,0%), 1,4,6-Glc p  (1,6%) và 1,2-Man p  (1,9%) và 1,3-Gal p  (1,0%) và các điểm phân nhánh nằm ở O-2 hoặc O-6 của Glc p  với đầu cuối α- d -Glc p  như chuỗi bên. Lượng vết của 1,2-Man p  và 1,3-Gal p  các liên kết có thể nằm ngẫu nhiên trong các chuỗi bên ( Nie et al., 2011 ).

4.2. nucleoside

Nucleoside được cho là một trong những thành phần hoạt động chính trong CS ( Li, Li, Dong, & Tsim, 2001b ), trong đó adenosine và cordycepin đang được sử dụng làm chất đánh dấu để kiểm soát chất lượng. Hàm lượng nucleoside khác nhau giữa CS tự nhiên và CS nuôi cấy ( Li et al., 2001c ). Nhiều nucleoside khác đã được tìm thấy bao gồm uridine, một số cấu trúc riêng biệt của deoxyuridine, adenosine, 2′-3′-dideoxyadenosine, hydroxyethyladenosine, cordycepin triphosphate, guanidine, deoxyguanidine, không tìm thấy ở bất kỳ nơi nào khác trong tự nhiên. Adenosine và Cordycepin (3′-deoxyadenosine) là các thành phần có hoạt tính dược học thể hiện nhiều tác dụng dược lý như điều hòa miễn dịch, chống oxy hóa, v.v. Cordycepin ban đầu được chiết xuất từ   Đông trùng hạ thảo militaris.   Trần và Chu (1996)  đặc trưng cordycepin và 2′-deoxyadenosine, sử dụng cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) và quang phổ hồng ngoại (IR) trong dịch chiết CS ( Chen & Chu, 1996 ). Trong một nghiên cứu đánh giá chất lượng của CS,   Li và cộng sự, 2006a ,   Li và cộng sự, 2006b  xác định sự hiện diện của cordycepin trong CS bằng các phương pháp phân tích như điện di mao quản, HPLC và cũng báo cáo nó như một nguyên tắc hoạt động ( Li và cộng sự, 2006a ,   Li và cộng sự, 2006b ). Hơn nữa, phải đảm bảo có sự hiện diện của cordycepin để xác thực CS thật. Một số phương pháp phân tích và kỹ thuật nhận dạng khác đã được nghiên cứu như RP-HPLC ( Shiao et al., 1994 ,   Yu và cộng sự, 2006a ,   Yu et al., 2006b ), HPLC–ESI-MS ( Huang, Guo, Liang, & Chen, 2004 ), và HPLC-DAD ( Jiang, Liu, Li, & Jin, 2008 ) đã được sử dụng để xác định cordycepin . Ngoài adenosine và cordycepin, một số nucleoside và nucleobase khác đã được báo cáo trong chiết xuất nước của stroma và sâu bướm của CS như cytosine, uracil, cytidine, hypoxanthine, uridine, thymine, adenine, inosine, guanosine và thymidine ( Yuan, Zhao, Wang, Kuang, & Lưu, 2008 ).

4.3. Sterol

Ergosterol, một loại sterol chính được xác định trong CS bằng HPLC ( Li và Li, 1991 ,   Li và cộng sự, 2004 ) và tồn tại ở hai dạng, là ergosterol tự do và ergosterol ester hóa, có các chức năng sinh lý khác nhau ( Yuan, Wang, Liu, Kuang, & Zhao, 2007 ). Trong một nghiên cứu, hai sterol được phân lập từ chiết xuất metanol được phát hiện có hoạt tính chống khối u và cấu trúc của nó được thiết lập bằng quang phổ 1D và 2D NMR ( Bok, Lermer, Chilton, Klingeman, & Towers, 1999 ). Cholesterol, campesterol và β-sitosterol bao gồm ergosterol trong CS tự nhiên (hoang dã) được xác định bằng phương pháp chiết xuất chất lỏng có áp suất (PLE), tạo dẫn xuất trimethylsilyl (TMS) và phân tích GC–MS ( Yang, Feng, Zhao, & Li, 2009 ). Những phytosterol này đóng vai trò quan trọng trong điều trị ung thư ruột kết, tuyến tiền liệt, ung thư vú và hoạt tính sinh học của chúng rất hữu ích trong việc làm sáng tỏ các chỉ định điều trị CS.

5.1. khai thác nước

Nước là một phân tử phân cực cao, chiết xuất các hợp chất phân cực như nucleoside và polysacarit của CS và tỷ lệ nước so với vật liệu đã được nghiên cứu để thu được phần polysacarit tối đa. Một nghiên cứu đã báo cáo các điều kiện chiết xuất tốt nhất: nước: bột CS = 2,5:1, pH 7,5–8,0 và thời gian chiết xuất 24 giờ ( Sun, Zhang, & Lei, 2003 ). Năng suất khai thác nước nóng có thể thay đổi trong khoảng 25–30% và có những lợi ích sức khỏe tiềm năng như hoạt động chống oxy hóa ( Li et al., 2003 ,   Yamaguchi và cộng sự, 2000b ).

5.2. Chiết xuất cồn

Methanol và etanol và/hoặc dung dịch nước metanol và etanol cũng là những dung môi tốt để chiết xuất các hoạt chất sinh học từ CS. Những chiết xuất cồn này rất giàu hoạt chất sinh học rất mạnh như nucleoside, polysacarit, protein. Chiết xuất Ethanolic cho thấy hoạt tính chống oxy hóa mạnh ( Yamaguchi et al., 2000b ), duy trì chức năng tế bào β và cung cấp khả năng bảo vệ tái tạo ( Kan et al., 2012 ). Chiết xuất metanol thu được từ chất lỏng nuôi cấy CS cũng cho thấy tác dụng gây độc tế bào đối với các dòng tế bào ung thư ( Jia et al., 2009 ). Thông tin thêm về tác dụng dược lý của các chất chiết xuất như vậy hoặc các phần tinh khiết của chất chiết xuất sẽ được thảo luận trong phần sau.

5.3. Chiết xuất etyl axetat

Dịch chiết etyl axetat của CS chứa một nhóm hợp chất khác với các hợp chất thường thấy trong dịch chiết nước và cồn. Mặc dù năng suất trong phương pháp này thấp, nhưng nó chứa carbohydrate, adenosine, ergosterol và một lượng nhỏ cordycepin, trong đó ergosterol và các hợp chất liên quan được xác định là một loại thành phần hoạt tính chính góp phần vào   trong ống nghiệm  gây độc tế bào. Nó gây ra quá trình chết theo chương trình trong các tế bào HL60 bệnh bạch cầu tiền tủy xương ở người với ED 50 ± 25 μg/ml trong 2 ngày điều trị ( Zhang, Wu, Hu, & Li, 2004 ) và ức chế sự phát triển của các dòng tế bào ung thư ( Wu, Zhang, & Leung , 2007a ). Nghiên cứu sâu hơn được sử dụng để hiểu các đặc điểm cấu trúc và hiệu quả của các hợp chất hoạt động trong chiết xuất etyl axetat. Chiết xuất ether dầu hỏa được báo cáo là có hoạt tính chống oxy hóa mạnh, đáp ứng miễn dịch tế bào và dịch thể và tác dụng điều hòa miễn dịch ( Wu et al., 2006 ,   Wu và cộng sự, 2007a ).

6.1. hoạt động thích nghi

Về cơ bản, các chất thích nghi thuộc về một nhóm các chất điều hòa trao đổi chất làm tăng khả năng thích nghi của sinh vật với các yếu tố môi trường và tránh thiệt hại từ các yếu tố đó. Các nghiên cứu cho thấy CS cũng sở hữu một phương pháp khắc phục tiềm năng đối với các yếu tố có hại như căng thẳng, lão hóa, v.v. Trong một thí nghiệm nghiên cứu tác dụng chống lão hóa của chiết xuất CS bằng nước nóng, những con chuột già đi   d -galactose và chuột bị thiến đã được điều trị. Nghiên cứu tương tự đã báo cáo các đặc tính chống lão hóa của CS ( Chen & Li, 1993 ). Nghiên cứu chỉ ra rằng chiết xuất CS cải thiện hoạt động của superoxide dismutase, glutathione peroxidase và catalase, đồng thời làm giảm mức độ peroxid hóa lipid và hoạt động monoamine oxidase ở chuột già ( Ji et al., 2009 ). Hơn nữa, chiết xuất nước nóng của sợi nấm ((150 mg/kg/ngày) cho thấy sự ức chế đáng kể chống lại sự gia tăng cholesterol toàn phần và giảm nồng độ phosphatase kiềm ở chuột được cho uống bằng chiết xuất CS ( Koh, Kim, Kim, Song, & Suh, 2003 ).

6.2. tác dụng điều hòa miễn dịch

Loại thảo mộc Trung Quốc này rất hữu ích trong việc ngăn ngừa và điều trị nhiều bệnh liên quan đến tuổi tác.   Kuo, Tsai, Shiao, Chen và Lin (1996)  báo cáo rằng CS có chứa các thành phần ức chế miễn dịch không gây độc tế bào trên các tế bào đơn nhân của con người. Các phân đoạn khác nhau (phân đoạn cột) của chiết xuất MeOH, đã được thử nghiệm để tạo ra phản ứng tăng sinh tế bào lympho, hoạt động của tế bào giết người tự nhiên (NK) và phytohemagglutinin (PHA) kích thích interleukin-2 (IL-2) và yếu tố hoại tử khối u-alpha (TNF- α) trên tế bào đơn nhân người (HMNC). Trong số 15 phân số cột, hai phân số (CS-36-39 và CS-48-51) ức chế đáng kể phản ứng phát sinh phôi (IC ₅₀  = 71,0 ± 3,0 và 21,7 ± 2,0 μg/ml, tương ứng), hoạt động của tế bào NK (IC ₅₀  = 25,0 ± 2,5 và 12,9 ± 5,8 μg/ml, tương ứng), quá trình sản xuất IL-2 của HMNC được kích thích bởi PHA (IC ₅₀  = 9,6 ± 2,3 và 5,5 ± 1,6 μg/ml, tương ứng) và cản trở sản xuất TNF-α trong môi trường nuôi cấy HMNC (IC ₅₀  = 2,7 ± 1,0 và 12,5 ± 3 μg/ml, tương ứng) ( Kuo và cộng sự, 1996 ). Và cùng một nhóm nghiên cứu đã tiến hành thử nghiệm lâm sàng trên người (năm đối tượng nam; tuổi trung bình là 35) và báo cáo rằng chiết xuất metanol từ quả thể của CS có chứa các chất điều hòa miễn dịch, gây ra sự điều hòa chức năng của tế bào dịch rửa phế quản phế nang (BALF). Trong nghiên cứu này, lipopolysacarit (LPS) gây ra sự tăng sinh tế bào dịch rửa phế quản phế nang (BALF), sản xuất các cytokine gây viêm và biểu hiện gen được đánh giá sau khi điều trị bằng chiết xuất CS MeOH. Nó cho thấy tác dụng ức chế (92,6% ở mức 200 mg/ml) đối với sự tăng sinh tế bào BALF khi được kích thích bằng LPS. Hơn nữa, CS-19-22 trong số 15 phân số phụ, cho thấy các hoạt động tốt hơn: (1) ức chế sự tăng sinh tế bào BALF (phụ thuộc vào liều lượng), (2) giảm IL-1b, IL-6, IL-8, IL-10 và TNF Sản xuất -α trong nuôi cấy tế bào BALF được kích hoạt LPS, (3) tăng cường sản xuất IL-12 và sản xuất IFN-g trong các tế bào BALF được kích hoạt ( Kuo et al., 2001 ).

Trong một nghiên cứu để tìm ra tiềm năng của một số loại thảo mộc Trung Quốc viz.   Atractylodes ovata ,   Anqelica sinensis ,   C. sinensis ,   Rượu lucidum ,   Codonopsis pilosula  Và   Homo sapiens  trên bệnh lupus ban đỏ hệ thống (SLE) là một bệnh tự miễn dịch quan trọng. CS đã cải thiện khả năng sống sót và ức chế sản xuất kháng thể DNA chống ds ở chuột lupus (NZB/NZW F1) và cũng cải thiện quá trình sản xuất IL-2 bị lỗi ( Chen et al., 1993 ).   Liu, Lu và Ji (1992)  gợi ý rằng CS có thể được sử dụng như một cách tiếp cận liệu pháp điều chỉnh phản ứng sinh học (BRMT) trong điều trị bệnh bạch cầu. Tương tự, một nghiên cứu khác đã báo cáo rằng CS có thể tăng cường hoạt động của tế bào NK và cải thiện biểu hiện dấu hiệu CD16 trên tế bào lympho và khả năng liên kết với tế bào K562 ( Liu et al., 1992 ). Hơn nữa, phân đoạn axit polysacarit (APSF), từ dạng biến dạng của CS đã kích thích hoạt động trên các đại thực bào nơi tăng biểu hiện của TNF-α, IL-12 và iNOS, đồng thời làm giảm biểu hiện IL-10 của tế bào Ana-1 ( Chen , Yuan, Wang, Song, & Zhang, 2012 ). Mặt khác, chiết xuất CS đã được tìm thấy để tăng cường biểu hiện kháng nguyên MHC lớp II trên các tế bào HA22T/VGH của dòng tế bào ung thư gan người HA22T/VGH. Sự duy trì miễn dịch của kháng thể đơn dòng (MAb) L243 chống lại vùng HLA DR của các kháng nguyên MHC lớp II đã được phân tích bằng phương pháp đo huỳnh quang tế bào trong đó chiết xuất CS điều chỉnh biểu hiện kháng nguyên MHC lớp II làm cho việc giám sát miễn dịch của vật chủ chống lại các tế bào khối u hiệu quả hơn ( Chiu et al., 1998 ).

Một hợp chất tinh khiết (H1-A) được phân lập từ CS được báo cáo là có tác dụng điều hòa miễn dịch tốt bằng cách cải thiện khả năng sống sót của chuột lupus làm giảm sản xuất anti-ds-DNA. Trong biểu hiện lâm sàng, nhóm được điều trị đã giảm bệnh hạch bạch huyết, chậm tiến triển protein niệu và cải thiện chức năng thận và tiết lộ rằng không có thay đổi đáng kể nào trong sự lắng đọng phức hợp miễn dịch ( Lin et al., 1999 ,   Yang và cộng sự, 1999 ). Tác dụng ức chế miễn dịch của CS đã được chứng minh trong đó CS cho thấy tác dụng ức chế đối với phản ứng miễn dịch tức là. chức năng thực bào của bạch cầu trong máu ngoại vi, phản ứng phân bào của tế bào lympho lách với Con A, và nuôi cấy tế bào lympho hỗn hợp và giải phóng đại thực bào IL-1 do LPS gây ra ( Zhu & Yu, 1990 ). Trong một nghiên cứu khác, người ta đã nghiên cứu tác dụng ức chế của chế phẩm CS (CS-1) đối với phản ứng miễn dịch gây thải ghép nội tạng. Hơn nữa, CS-1 có thể kéo dài thời gian sống sót của quả tim được ghép mà không gây nhiễm trùng và nó không gây tác dụng phụ có hại cho cơ quan quan trọng ( Zhang & Xia, 1990 ).

Các exo-polysacarit thu được từ quá trình lên men chìm của CS góp phần vào hoạt động điều hòa miễn dịch bằng cách tăng cường tổng hợp cytokine, biểu hiện CD11b và thực bào ( Kuo, Chang, Cheng, & Wu, 2007 ). Đặc biệt là các exo-polysacarit (Fr. A) chịu trách nhiệm sản xuất TNF-α, IL-6 và IL-10 phụ thuộc vào liều lượng, làm tăng biểu hiện bề mặt của CD11b trong bạch cầu đơn nhân và bạch cầu đa nhân trung tính (PMN), đồng thời tăng thực bào trong bạch cầu đơn nhân và PMN. Mặt khác, các polysacarit nội bào (Fr. B) gây ra sự giải phóng TNF-α vừa phải, biểu hiện CD11b và quá trình thực bào.

Một số thử nghiệm trên người đã được tiến hành để kiểm tra hiệu quả của CS đối với việc suy giảm chức năng miễn dịch đối với bệnh nhân suy thận mãn tính (CRF) (nhóm nghiên cứu) và kết quả cho thấy giảm OKT3, OKT4 và OKT4/OKT8 trong CRF, tỷ lệ xuất hiện của OKT4 và OKT4 /OKT8 đến nồng độ albumin và Hb huyết tương. Nó cũng cải thiện chức năng thận và tăng tỷ lệ OKT4 và OKT4/OKT8 ( Guan, Hu, & Hou, 1992 ).

Việc điều chế CS (Cs-Cr) ở dạng tinh thể có thể làm tăng đáng kể các tế bào trợ giúp T và tỷ lệ Lyt-1/Lyt-2 (T trợ giúp so với tế bào ức chế T) cả trong máu ngoại vi và lá lách của chuột được điều trị và cũng có thể bảo vệ chống lại thuốc ức chế miễn dịch tác dụng của prednisolone axetat và cyclophosphamide đối với tế bào hỗ trợ T ( Chen, Chen, Sun, Hsieh, & Henshall, 1991 ). Theo quan điểm này, có khả năng sử dụng CS để điều trị bệnh nhân suy giảm miễn dịch hoặc ức chế miễn dịch ( Guan et al., 1992 ).

Chiết xuất cồn của CS đóng vai trò bảo vệ quan trọng chống lại viêm cơ tim ở chuột do virus gây ra bằng cách tạo ra IFN-γ và điều hòa tế bào lympho T ( Li et al., 2006a ,   Li và cộng sự, 2006b ) và mô hình cấy vi khuẩn túi khí tương tự đã được sử dụng để nghiên cứu hiệu quả bảo vệ của chiết xuất sợi nấm CS đối với nhiễm trùng liên cầu khuẩn nhóm A (GAS) ( Kuo và cộng sự, 2005 ). Mặt khác, chiết xuất nước cho thấy tác dụng điều hòa miễn dịch kiêm tác dụng chống viêm trong đó CS đóng vai trò là chất kích hoạt và chất cảm ứng của các tế bào Dendritic chưa trưởng thành (DC) bằng cách kích thích biểu hiện bề mặt của CD11c, CD205, CD40, CD80, CD83, CD86 và MHC-II làm cho DC chưa trưởng thành trưởng thành với hoạt động nội tiết giảm, thúc đẩy sự phân cực Th1. Điều này chỉ ra rằng CS có khả năng điều chỉnh các DC theo hướng miễn dịch qua trung gian tế bào ( Li et al., 2009 ). Cơ chế này có thể được mô tả rõ ràng trong   Hình 3  . Có rất ít nghiên cứu cung cấp thông tin về tác dụng điều hòa miễn dịch của CS ( Chen, 1983 ,   Trần, 1985 ,   Trương, 1985 ).

Hình 3

Tác dụng điều hòa miễn dịch của   Trùng Thảo  trên các tế bào đuôi gai ở hai giai đoạn sinh lý khác nhau: viêm ngây thơ và do LPS gây ra. Một nghiên cứu chứng minh   Trùng Thảo  hoạt động như một chất kích hoạt và cảm ứng trưởng thành của các DC chưa trưởng thành gây ra sự tăng sinh tế bào T, mồi các DC hướng tới khả năng miễn dịch Th1 kiêm phản ứng qua trung gian tế bào. Mặt khác, CS điều chỉnh tình trạng viêm do LPS gây ra. CSF, yếu tố kích thích thuộc địa; DC, tế bào đuôi gai; CS, chiết xuất nước của   Trùng Thảo  (Chuyển thể từ:   Li và cộng sự, 2009 ).

6.3. hoạt động chống oxy hóa

CS thu hút nhiều mối quan tâm nghiên cứu về hoạt động chống oxy hóa của nó.   Li, Su, Dong và Tsim (2002)  đã báo cáo rằng chiết xuất sợi nấm thu được từ xơ cứng và chất nền của CS cho thấy các hoạt động chống oxy hóa tương tự như peroxid hóa lipid, xanthine oxidase và gây ra các xét nghiệm tán huyết ( Li et al., 2002 ). Các chiết xuất dung môi khác nhau của CS có hiệu quả trong việc loại bỏ các gốc hydroxyl ( Cai, Zhang, Chen, & Yin, 2004 ), các gốc anion superoxide ( Zhang, Pu, Yin, & Zhong, 2003 ). Cả nước và chiết xuất ethanol của CS đều cho thấy tác dụng nhặt rác đối với các loại oxy phản ứng (ROS) bằng cách ức chế sự hình thành malondialdehyde bởi chất tạo peroxynitrite SIN-1 ( Yamaguchi et al., 2000a ,   Yamaguchi và cộng sự, 2000b ). Tác dụng chống oxy hóa tương tự của chiết xuất nước nóng từ sợi nấm tự nhiên và nuôi cấy của CS sử dụng sáu   trong ống nghiệm  xét nghiệm đã được điều tra. Các chất chiết xuất cho thấy hiệu quả vượt trội trong việc ức chế peroxid hóa linoleic với tỷ lệ ức chế trên 90%, các hoạt động nhặt rác đối với anion superoxide và các gốc hydroxyl thấp hơn một chút so với BHT, các hoạt động nhặt rác DPPH ức chế trên 80% và khả năng khử vừa phải và hoạt tính thải sắt ion ( Dong & Yao, 2007 ) ( Hình 4  ).

Hình 4

Sơ đồ thí nghiệm đơn giản hóa mô tả quá trình chống khối u và quá trình chết theo chương trình do cordycepin gây ra. Cordycepin trong chiết xuất nước nóng của   Trùng Thảo  cho thấy các hành động ức chế bằng cách kích thích các thụ thể adenosine lần lượt kích hoạt con đường protein kinase C có thể được kích hoạt thông qua DAG, PLC và Ca ²⁺ . Con đường truyền tín hiệu này kích thích quá trình tạo steroid dẫn đến sản xuất progesterone mang lại tác dụng chống khối u. Mặt khác, cordycepin gây ra tín hiệu căng thẳng gây độc tế bào đến ty thể kích hoạt con đường xếp tầng caspase 9, 3,7 thông qua apoptosome. Con đường xếp tầng theo tầng này dẫn đến sự phân mảnh DNA, sự chảy máu trong huyết tương, đặc trưng của quá trình chết theo chương trình (Chuyển thể từ:   Hoàng và cộng sự, 2000 ,   Hoàng và cộng sự, 2001 ,   Jen và cộng sự, 2011 ,   Leu và cộng sự, 2011 ,   Pao và cộng sự, 2012 ,   Yoshikawa và cộng sự, 2011 ). CHWE – Hàm lượng Cordycepin trong chiết xuất nước nóng của   Trùng Thảo;  PLC – Phospholipase C; PKC – Protein kinase C; Apaf 1 – Yếu tố kích hoạt peptidase apoptotic 1; PIP2 – photphatdylinositol – bisphotphat; DAG – Diacyleglycerol.

6.4. chống ung thư

Nấm dược liệu hứa hẹn nhất cho điều trị ung thư và   đông trùng hạ thảo  đã được sử dụng hiệu quả như một loại thảo mộc chống khối u trong y học Trung Quốc ( Ji, 1999 ). Một số nghiên cứu trước đây đã báo cáo các hoạt động chống khối u của CS tự nhiên và được trồng trọt ( Yamaguchi et al., 1990 ). Về cơ bản chiết xuất nước hoặc rượu có chứa các hợp chất phân cực góp phần chống ung thư. Tác dụng chống ung thư tương tự của chiết xuất nước ấm của CS khô đã được nghiên cứu, trong đó ung thư biểu mô cổ trướng Ehrlich (EAC), dị hợp với chuột ICR, Meth A fibrosarcoma (Meth A), tổng hợp với chuột BALB/c được sử dụng làm dòng tế bào khối u đích và báo cáo rằng tác dụng chống khối u của chiết xuất có thể được trung gian thông qua hoạt động điều hòa miễn dịch của nó ( Yoshida et al., 1989 ).   Nakamura và cộng sự. (1999)  đã nghiên cứu tác dụng của chiết xuất nước CS (WECS) đối với sự di căn gan của ung thư biểu mô phổi Lewis (LLC) và tế bào u ác tính B16 (B16) ở chuột. Trong cả hai thí nghiệm LLC và B16, chiết xuất nước cho thấy tác dụng gây độc tế bào mạnh, không phải do cordycepin mà chỉ vì các thành phần khác ( Nakamura et al., 1999 ) và hơn nữa, có báo cáo rằng cordycepin có tác dụng ức chế sự phát triển của khối u ác tính ở chuột và tế bào ung thư biểu mô phổi bằng cách kích thích thụ thể adenosine A3 trên tế bào khối u ( Nakamura et al., 2006 ). Trong các nghiên cứu gần đây, chiết xuất nước từ quả thể khô của CS nuôi cấy, được đánh giá về tác dụng chống ung thư, trong đó cordycepin là một chất chuyển màu hiệu quả trong chiết xuất nước và cho thấy tác dụng chống ung thư trên các tế bào B16–BL6, tế bào LLC, Các tế bào u xơ sợi ở người HT1080 (HT1080) và tế bào ung thư biểu mô ruột kết ở người (CW-2) bằng cách kích thích thụ thể adenosine A3 (A3-R) ( Yoshikawa et al., 2011 ) và theo sau đó là hoạt hóa Glycogen Synthase Kinase-3β và Cyclin D1 triệt tiêu bằng cách sử dụng xét nghiệm liên kết đồng vị phóng xạ ( Yoshikawa et al., 2008 ).

Chiết xuất metanol từ thể quả của CS cho thấy tác dụng ức chế các dòng tế bào khối u (tế bào K562, Vero, Wish, Calu-1 và Raji) ( Kuo et al., 2006 ) và được báo cáo rằng khối u có trọng lượng phân tử thấp các chất ức chế tăng trưởng tế bào, ngoài cordycepin và polysacarit trong CS chịu trách nhiệm cho tác dụng này. Vai trò của chiết xuất ethanol của CS (CS-II) như một tác nhân tăng cường miễn dịch trong điều trị ung thư và bệnh nhân suy giảm miễn dịch đã được báo cáo ( Xu, Peng, Chen, & Chen, 1992 ).

Hai sterol chống ung thư (ergosterol) được phân lập từ dịch chiết trong metanol của sợi nấm nuôi cấy CS, được phát hiện có tác dụng ức chế (dạng glycosterol hóa của ergosterol peroxide) sự tăng sinh của các dòng tế bào khối u K562, Jurkat, WM-1341, HL-60 và RPMI-8226 hiệu quả hơn ( Kodama, Mc Caffrey, Yusa, và Mitsuya (2000) ). Hơn nữa, các phân đoạn chloroform và n-butanol của chiết xuất metanol từ CS đã được nghiên cứu cho   trong ống nghiệm  hoạt động ức chế tăng trưởng tế bào khối u. Các chất chiết xuất được thử nghiệm cho thấy sự ức chế phụ thuộc vào liều lượng đối với việc tăng cường sản xuất TNF-α và IL-12 trong các đại thực bào phúc mạc ở chuột được kích hoạt LPS/IFN-γ. Mặt khác, các chất chiết xuất này cũng được đánh giá về hoạt tính tăng sinh tế bào khối u trong các loại tế bào ung thư khác nhau như Jurkat, HepG2, PC 3, Colon 205, và MCF 7 cũng như các PBMC bình thường và cho thấy sự ức chế tăng trưởng trên những chất chiết xuất này. các tế bào ung thư nhưng không có tác dụng gây độc tế bào đối với các PBMC bình thường trong phạm vi nồng độ được nghiên cứu (0–150 μg/ml) ( Rao, Fang, & Tzeng, 2007 ). Tác dụng ức chế của CS cũng được báo cáo bởi một số nhà nghiên cứu khác ( Chen et al., 1997 ,   Du, 1986 ,   Lâm, 1984 ,   Trương, 1987 ).

6.5. Hoạt động chống bệnh tiểu đường

Bệnh tiểu đường là một vấn đề sức khỏe phổ biến nghiêm trọng, đặc biệt là trong cộng đồng dựa vào chế độ ăn uống phương Tây. Một lượng lớn nghiên cứu đã được tiến hành về tác dụng có lợi của CS đối với quá trình chuyển hóa đường huyết và tiềm năng của nó như một tác nhân điều chỉnh lượng đường trong máu.

Trong một   trong cơ thể sống  nghiên cứu dược lý, Cordy Max™ Cs-4, một sản phẩm lên men sợi nấm của CS, được sử dụng để kiểm tra hiệu quả cải thiện chuyển hóa glucose và độ nhạy insulin của nó. Các can thiệp nghiên cứu được xác định trong 17 ngày đối với chuột Wistar trưởng thành (đực và cái) và đo đường huyết lúc đói, insulin huyết tương lúc đói, chỉ số glucose-insulin và dung nạp glucose đường uống. Nó gây ra: (1) giảm đường huyết lúc đói, (2) giảm 37% insulin huyết tương lúc đói ở nhóm điều trị liều cao, (3) tăng chỉ số glucose-insulin, (4) cải thiện dung nạp glucose ở mức 0,5, 1,0, và 2 giờ sau khi uống một lượng lớn glucose ( Zhao et al., 2002 ).

Trong một nghiên cứu so sánh hoạt động chống tăng đường huyết của CS tự nhiên và CS lên men, chuột Wistar đực bị gây ra bệnh tiểu đường bởi nicotinamide và streptozotocin. Những con chuột này được cho uống giả dược (nhóm STZ), thể quả (nhóm FB, 1 g/ngày), hệ sợi nấm lên men (nhóm MCS, 1 g/ngày), canh thang lên men (nhóm BCS, 1 g/ngày) hoặc lên men sợi nấm cộng với nước dùng (nhóm XCS, 0,5 g/ngày mỗi loại) của CS. Nồng độ glucose trong máu và nồng độ fructosamine trong huyết thanh thấp hơn đáng kể ở nhóm FB, MCS, BCS và XCS so với nhóm STZ. Điều này chỉ ra rằng, các sản phẩm lên men của CS có thể được phát triển thành các chất chống đái tháo đường tiềm năng hoặc thực phẩm chức năng cho những người có nguy cơ mắc bệnh đái tháo đường cao ( Lo, Hsu, Tu, & Lin, 2006 ). Nghiên cứu lâm sàng tương tự trên những bệnh nhân mắc bệnh tăng đường huyết khi được điều trị hàng ngày bằng CS (3 g cho thấy sự cải thiện về lượng đường trong máu của họ là 95% trong khi những người được điều trị y tế chính thống chỉ cải thiện được 54% ( http://www.advancedalternativescenter.com/Marvlix_with_Cordyceps_Sinensis_p /marvlix.ht ).   đông trùng hạ thảo  cải thiện chuyển hóa đường huyết và tăng độ nhạy insulin ở động vật bình thường ( Zhao et al., 2002 ).

6.6. Hoạt động chống viêm

Quá trình chống viêm được coi là nguy cơ hoặc yếu tố khởi phát đột quỵ ở người. Nhiều tác nhân dược lý hiệu quả được sử dụng để điều trị các bệnh viêm nhiễm và các mục tiêu dược lý mới tiếp tục được khám phá, đây là một lĩnh vực quan trọng đối với y học tịnh tiến. Gần đây CS được phát hiện là có hiệu quả chống lại các phản ứng viêm.

Trong một nghiên cứu, các chất chiết xuất từ ​​dầu thô và các phân đoạn tinh khiết một phần của sợi nấm CS đã được thử nghiệm về tác dụng ức chế của chúng đối với việc tạo ra anion superoxide và giải phóng elastase bởi bạch cầu trung tính của con người để đáp ứng với   N -formyl-methionyl-leucyl phenylalanine/cytochalasin B (FMLP/CB). Lần đầu tiên, năm thành phần của Cordysinin A–E (1–5) đã được xác định và cho thấy có sự ức chế đáng kể ( Yang, Kuo, Hwang, & Wu, 2011 ). Cordymin, một peptide tinh khiết từ loại nấm này được phát hiện có tác dụng chống lại các cytokine (IL-1β và TNF-α) để giảm mức độ nghiêm trọng của phản ứng viêm. Cordymin-2 và cordymin-4 cho thấy hiệu quả ức chế lần lượt là 53 và 73% ( Qian et al., 2012 ).   Liu, Li, Zhao, Tang và Guo (2011)  đã chứng minh khả năng bảo vệ thần kinh của việc ức chế sợi nấm CS thông qua việc chống viêm trong mô hình chuột tái tưới máu do thiếu máu cục bộ ( Liu và cộng sự, 2011 ). Các phân đoạn chloroform và n-butanol của chiết xuất metanol từ CS đã được nghiên cứu về hoạt tính chống viêm của chúng. Các chiết xuất được thử nghiệm cho thấy sự ức chế phụ thuộc vào liều lượng trong việc tăng cường sản xuất các chất trung gian gây viêm như oxit nitric (NO) thông qua việc giảm biểu hiện NO synthase cảm ứng ( Rao et al., 2007 ).

6.7. bảo vệ thận

Trong một thời gian dài điều trị viêm thận, CS đã được chứng minh là có đóng góp lớn và đã được sử dụng liên tục. MỘT   trong ống nghiệm  mô hình nhằm giải quyết vấn đề sinh bệnh học của immunoglobulin a nephropathy (IgAN) do tác động có hại của các cytokine và các yếu tố tăng trưởng được giải phóng bởi các tế bào trung mô khi được kích thích bởi phức hợp miễn dịch IgA nephritogen (IgAIC). Do đó, chế độ kích hoạt tế bào trung mô của con người (HMC) đã được thiết lập và ủ với IL-1 và IL-6. Dịch chiết MeOH thô thu được từ thể quả của CS, tiếp tục được phân đoạn bằng sắc ký cột silica gel để có 6 phần. Fraction (F-2), một trong số chúng được phát hiện là có hiệu quả chống lại IL-1 và IL-6. Hơn nữa trong mô hình động vật IgAN nơi tiểu máu và protein niệu được gây ra bởi R36A (Pneumococcal C-polysacarit được tinh chế từ   Streptococcus pneumoniae ) dưới dạng kháng nguyên và kháng thể đơn dòng IgA kháng R36A. Những con chuột trong mô hình IgAN được cho ăn 1% F-2 trong chế độ ăn đã giảm đáng kể tiểu máu và protein niệu cùng với sự cải thiện mô bệnh học. H1-A, một hợp chất tinh khiết có thể ức chế HMC đã hoạt hóa và làm giảm bớt IgAN (bệnh Berger) với sự cải thiện về mặt lâm sàng và mô học ( Ding et al., 2011 ).

Do tác dụng phụ nghiêm trọng, liều cao cyclosporin A (CsA) không thể được sử dụng trong điều trị lâu dài cho người nhận ghép thận. Khi bệnh nhân ghép thận được điều trị bằng CS, nó gây ra: (1) ít biến chứng nhất trong nhóm điều trị, (2) không có sự khác biệt đáng kể về nồng độ IL-2 trong huyết thanh ở hai nhóm và nồng độ IL-10 trong huyết thanh trong điều trị nhóm. Nghiên cứu đề xuất rằng CS có thể được sử dụng kết hợp với CsA liều thấp trong điều trị lâu dài cho bệnh nhân ghép thận ( Ding et al., 2009 ,   Ding et al., 2011 ) và cả trong các thí nghiệm cấp tính và mãn tính tương tự CS cho thấy bảo vệ thận khỏi cyclosporine A nephrotoxicity (CsA-Nx) và cải thiện tổn thương cầu thận và mô kẽ ( Zhao & Li, 1993 ). Trong một nghiên cứu khác, tác dụng của CS đối với độc tính trên thận do aminoglycoside (AG) gây ra đã được đánh giá. Những con chuột bị tổn thương ống thận cho thấy sự cải thiện khả năng chữa lành sau khi điều trị, được chứng minh bằng sự gia tăng ít nổi bật hơn của BUN, SCr, bài tiết natri, NAGase trong nước tiểu và mức độ thay đổi mô bệnh học ít nghiêm trọng hơn so với đối chứng ( Li, Zheng, & Liu, 1996 ). Trong một nghiên cứu tương tự, tác dụng bảo vệ đối với độc tính trên thận của aminoglycoside do CS ở những bệnh nhân lớn tuổi cũng được quan sát thấy ( Bao et al., 1994 ,   Zhu và Rippe, 2004 ).

Tác dụng chữa bệnh của CS đối với bệnh thận mãn tính đã được chứng minh ( Zhong et al., 2011 ). CS đã được thử nghiệm trên chuột bị cắt bỏ thận 5/6 và vào tuần thứ 4 và 8 sau khi cắt bỏ thận 5/6, những con chuột đã bị hy sinh thận, lấy huyết thanh và nước tiểu để lấy  Phân tích quang phổ ¹ H NMR. Tác dụng chữa bệnh của CS cũng được xác nhận bằng kết quả siêu hình học.

Nhiều thử nghiệm trên người đã được tiến hành để kiểm tra hiệu quả của CS trong việc ngăn ngừa tổn thương phổi và thận.   Châu và cộng sự. (2008)  nghiên cứu về khả năng tăng cường sức khỏe thận của CS ( http://www.advancedalternativescenter.com/Marvlix_with_Cordyceps_Sinensis_p/marvlix.ht ). Họ phát hiện ra rằng hiệu ứng này có thể đến từ việc tăng sản xuất đáng kể nồng độ 17-hydroxy-corticosteroid và 17-ketosteriod ( Hobbs, 1995 ).   Quan et al. (1992)  đã tiến hành một thử nghiệm trên 51 bệnh nhân bị suy thận mãn tính, đây là tình trạng đe dọa tính mạng thường ảnh hưởng đến người cao tuổi. Khi những bệnh nhân này được dùng thuốc (CS ở mức 3–5 g/ngày), nó cho thấy sự cải thiện đáng kể về chức năng thận ( Guan et al., 1992 ). Đôi khi suy thận thường liên quan đến các vấn đề xảy ra ở các cơ quan và hệ thống khác như tăng huyết áp, protein niệu và thiếu máu. Một nghiên cứu liên quan đến các đối tượng mắc các bệnh nói trên, được điều trị bằng CS. CS giảm huyết áp (15%) sau một tháng, giảm đáng kể protein niệu và tăng men superoxide dismutase. Nghiên cứu tiếp tục cho thấy rằng sự gia tăng khả năng nhặt gốc tự do của oxy trong máu, điều này sẽ dẫn đến giảm tổn thương tế bào do oxy hóa. Hơn nữa, 57 bệnh nhân bị tổn thương thận do gentamicin được điều trị bằng 4,5 g   đông trùng hạ thảo  mỗi ngày. CS cải thiện chức năng thận bình thường (89%) so với nhóm đối chứng (45%) sau sáu ngày, cho thấy CS rút ngắn thời gian hồi phục một cách hiệu quả ( Zhu & Rippe, 2004 ).

Hong, Zhang và Fan (2012) , trong một trong những giao thức can thiệp của họ để xem xét, đã thảo luận về việc sử dụng CS phổ biến như một chất ức chế miễn dịch bổ trợ trong cả điều trị duy trì dài hạn ban đầu cho những người nhận ghép thận ở Trung Quốc ( Hong và cộng sự, 2012 ) và một số nghiên cứu khác đã được thực hiện để cung cấp thông tin cần thiết về CS, chìa khóa cho sức khỏe của thận ( Xu, Huang, Jiang, Xu, & Mi, 1995 ).

6.8. Bảo vệ phổi và gan

Nhiều bệnh về đường hô hấp như hen suyễn, COPD và viêm phế quản đã được điều trị bằng CS, vốn đã được sử dụng như một biện pháp thúc đẩy sức khỏe đường hô hấp ở Trung Quốc trong hơn một nghìn năm. Gần đây, các thử nghiệm lâm sàng trên người đã được thực hiện để chứng minh   Đông trùng hạ thảo có khả năng tăng cường sử dụng oxy và hấp thu oxy của tế bào. Chuột được điều trị bằng CS để tìm kiếm tình trạng sống sót của chúng trong môi trường oxy thấp. Những con chuột sống sót lâu hơn ba lần so với những con chuột không được điều trị chấp nhận thực tế khoa học rằng CS có khả năng sử dụng oxy hiệu quả ( Zhu & Rippe, 2004 ) và cải thiện chức năng hô hấp ( Han, 1995 ,   Zheng và Deng, 1995 ).

Wang, Leeb, Chenc, Yud và Duh (2012)  điều tra các hành động bảo vệ gan của chiết xuất nước của cả CS và   đông trùng hạ thảo  và so sánh giữa chúng.   đông trùng hạ thảo  dịch chiết (CME) và dịch chiết CS (CSE) ở mức 500 μg/ml được xử lý bằng   t -butyl hydroperoxide (t-BHP) gây ra tế bào HepG2. Các chất chiết xuất cho thấy không có sự khác biệt đáng kể trong hoạt động của chúng đối với việc tạo ra các loại oxy phản ứng (ROS), hàm lượng chất hài hòa kích thích glutathione (GSH), sự hình thành TBARS và tỷ lệ Bcl-2/Bax. Nhưng CME cho thấy tác dụng ức chế tốt hơn đối với hoạt động caspase 3 và CSE thể hiện hoạt tính vượt trội đối với tiềm năng màng ty thể ( Wang et al., 2012 ).

6.9. Sự chết tế bào

Apoptosis là một cái chết tế bào được lập trình gây ra thông qua các yếu tố bên ngoài thông qua kích hoạt con đường Caspase 8 hoặc các yếu tố bên trong thông qua con đường ty thể. Caspase có vai trò to lớn trong con đường truyền tín hiệu apoptotic và đóng góp vào hình thái apoptotic tổng thể bằng cách gây ra những thiệt hại không thể đảo ngược đối với các thành phần tế bào.

Sterol trong chiết xuất metanol và ethyl axetat của sợi nấm nuôi cấy CS được báo cáo là có tác dụng gây chết theo chương trình mạnh đối với các tế bào HL-60 bệnh bạch cầu tiền tủy bào, gây ra sự phân mảnh DNA vốn là đặc điểm của các tế bào theo chương trình ( Matsuda et al., 2009 ). Công trình tương tự chứng minh, cordycepin trong chiết xuất CS gây ra quá trình chết theo chương trình của tế bào khối u Leydig chuột MA-10 thông qua việc kích hoạt con đường caspase-9 và -3 và -7. Phương pháp điều trị bằng cordycepin dẫn đến làm tròn tế bào, chảy máu màng sinh chất và phân mảnh DNA bằng cách bắt giữ các giai đoạn tổng hợp trước nguyên phân. Nghiên cứu cho thấy cơ chế tác dụng chống ung thư qua trung gian apoptotic của cordycepin ( Jen, Lin, Huang, & Leu, 2011 )   Hình 4 . Nghiên cứu tương tự đã báo cáo quá trình chết theo chương trình của các tế bào HL-60 bằng chiết xuất sợi nấm CS ( Zhang và Wu, 2007 ,   Zhang et al., 2004 ) và các đặc tính chống apoptotic của CS ( Buenz, Weaver, Bauer, Chalpin, & Badley, 2004 ).

6.10. hoạt động kích thích tình dục

Hoạt động kích thích tình dục gần đây đã được báo cáo do nghi ngờ testosterone giống như chất chuyển hóa và hoạt động thúc đẩy ham muốn tình dục trong CS. Vương và cộng sự. báo cáo rằng CS có chứa một yếu tố kích thích sản xuất corticosteroid trong mô hình động vật. Trong nghiên cứu này, một chiết xuất hòa tan trong nước của CS đã được sử dụng để nghiên cứu chức năng dược lý của nó đối với việc nuôi cấy tế bào tuyến thượng thận sơ cấp của chuột và con đường truyền tín hiệu liên quan. Nhưng các tác giả không chắc chắn về cơ chế của CS gây ra steriodogenesis, cho dù nó tác động trực tiếp lên tuyến thượng thận hay gián tiếp thông qua trục dưới đồi-tuyến yên ( Wang, Lee, Lin, & Chang, 1998 ). Một nghiên cứu báo cáo rằng chiết xuất nước nóng có tác dụng có lợi nhẹ đối với chức năng tình dục ở chuột bị thiến ( Ji et al., 2009 ).

Một nghiên cứu lâm sàng báo cáo rằng việc bổ sung CS cho 22 nam giới cho thấy số lượng tinh trùng tăng lên (33%) và giảm tỷ lệ dị tật tinh trùng (29%) ( Guo, 1986 ) .  Trong một nghiên cứu khác liên quan đến cả nam và nữ trên 189 bệnh nhân bị giảm ham muốn và ham muốn cho thấy sự cải thiện các triệu chứng và ham muốn là 66% khi điều trị bằng CS ( Wan, Guo, & Deng, 1988 ). Hơn nữa, sau khi bổ sung CS giúp ngăn ngừa và cải thiện tuyến thượng thận và hormone tuyến ức, đồng thời số lượng tinh trùng vô sinh được cải thiện 300% ( Huang et al., 1987 ), cải thiện ham muốn tình dục và ham muốn ở mức 86% ở phụ nữ ( Dong & Yao, 2007 ) .

Tác giả (SMG) công nhận giải thưởng học bổng nghiên cứu cao cấp từ Hội đồng Nghiên cứu Khoa học và Công nghiệp, New Delhi, Ấn Độ. Các tác giả cũng cảm ơn Giám đốc, CSIR-Viện Nghiên cứu Công nghệ Thực phẩm Trung tâm, Mysore, Ấn Độ vì sự khích lệ đã được đưa ra.